مقدمة:

الحمض النووي الريبي ، الاسم العلمي للحمض النووي الريبي ، يأتي اختصاره من RiboNucleic Acid ، وهو نوع من الحمض النووي يتكون عن طريق ربط عشرات على الأقل من الريبونوكليوتيدات من خلال روابط phosphodiester.

إن الفرضية الأساسية لاستكشاف الحمض النووي الريبي هي استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي الخالي من التلوث ، ويمكن تلخيص المبدأ الأساسي لاستخراج الحمض النووي الريبي تقريبًا على النحو التالي:

1. قم بتعطيل الخلايا أولاً

2. ثم قم بإزالة الشوائب الجزيئية (البروتينات ، الدهون ، الحمض النووي ، إلخ.)

3. أخيرًا ، يتم ترسيب الحمض النووي الريبي (RNA) أثناء إزالة الأملاح والمذيبات العضوية ، وزيادة تنقية الحمض النووي الريبي (RNA)

طريقة الاستخراج السابقة والحالية

الجيل الأول من طريقة استخلاص الحمض النووي الريبي هو طريقة ترسيب TRIzol (الكواشف المستخدمة تشمل غوانيدين أيزوثيوسيانات ، الفينول ، الكلوروفورم ، إلخ) التي اخترعها الجد بيوتر تشومزينسكي والجدة نيكوليتا ساكي ، لأن هذا الاختراع يسمح باستخراج الحمض النووي الريبي بسرعة وسهولة ، منذ ذلك الحين بدأت زيادة أبحاث الحمض النووي الريبي.

في وقت لاحق ، باع الجد هذه البراءة لشركة Invitrogen ، وروج Invitrogen هذه الطريقة للعالم وأصبحت طريقة مستخدمة على نطاق واسع.

في وقت لاحق ، تم شراء Invitrogen بواسطة Thermo!

منتج تمثيلي: كاشف TRIzol من Invitrogen

ومع ذلك ، تتطلب طريقة ترسيب TRIzol ترسيبًا متعددًا واستخراجًا من الحمض النووي الريبي ، والكواشف المستخدمة سامة وتستغرق وقتًا طويلاً للعمل.

لذلك ، ظهرت طريقة تنقية إنزيم العمود من الجيل الثاني إلى حيز الوجود ، وذلك باستخدام غشاء هلام السيليكا كمادة امتزاز حمض نووي محددة لتعظيم استرداد الحمض النووي الريبي في العينة مع إزالة الشوائب الأخرى.

تعمل طريقة الجيل الثاني على تبسيط العملية على أساس الأداء المستقر ، وتقليل عامل الخطر ، وتحسين كفاءة استخراج الحمض النووي الريبي.

المنتجات التمثيلية: QIAGEN RNeasy ومعظم المنتجات المحلية

ومع ذلك ، تتطلب طريقتا الجيل الأول والثاني استخدام DNase لإزالة تلوث الحمض النووي ، مما يسبب بعض الإزعاج للتجارب اللاحقة.سيقلل DNase المتبقي من كفاءة النسخ العكسي ويقلل من تخليق cDNA الأول ، وبالتالي يؤثر على دقة النتائج.

لذلك ، تم تحسين طريقة الاستخراج من الجيل الثالث على أساس الجيل الثاني.لا تحتاج التجربة إلى إضافة أي إنزيمات ، ويمكن الحصول على الحمض النووي الريبي بسهولة باستخدام عمودين فقط.

العمود 1: عمود تنظيف الحمض النووي لمسح الحمض النووي

العمود 2: عمود الحمض النووي الريبي فقط يمتص ويستعيد الحمض النووي الريبي على وجه التحديد

هذه العملية البسيطة لا توفر الوقت فحسب ، بل تسهل أيضًا تشغيل تجارب المصب!

المنتجات التمثيلية: QIAGEN RNeasy Plus وفورجينمنتجات سلسلة تنقية RNA

（ارنيسي بلس）

（فورجينمجموعة عزل الحمض النووي الريبي الكلي للنبات）

أخبرك بهدوء!تقدم مجموعة RNA من Foregene أيضًا ممحاة RNase سهلة الاستخدام للغاية ، والتي يمكنها إزالة 400 ميكروغرام من RNase تمامًا على السطح الصلب في دقيقة واحدة ، دون إضافة أي مواد سامة إلى جسم الإنسان!

صورة1: مخطط مقارنة العمليات التشغيلية

يمكن لمنتجات Foregene إكمال استخراج الحمض النووي الريبي في أغنيتين فقط ، فلا تجعل الآخرين يغارون من تقدم تجربتك!

صورة2:Eالنتائج التجريبية رسم بياني للمقارنة

الجيل الأول (1: TRIzol)

الجيل الثاني (2: RNeasy of QIAGEN)

الجيل الثالث (3: QIAGEN's RNeasy plus ، 4: Foregene)

صورة3: الرسم البياني qPCR (الرسم البياني لمنحنى التضخيم)

الجيل الأول (الأخضر يعني TRIzol - ، الأحمر يعني TRIzol +)

الجيل الثاني (السماء الزرقاء تعني QIAGEN RNeasy- ، الأحمر يعني QIAGEN RNeasy +)

الجيل الثالث (الأزرق يعني QIAGEN RNeasy plus ، الأخضر يعني Foregene)

(ملاحظة: يشير الرسم البياني qPCR "-" إلى أنه لم تتم إضافة DNase ولم تتم إزالة تلوث الحمض النووي. لذلك ، يكون التصوير المقطعي المحوسب أعلى والنتيجة غير دقيقة ؛ تشير "+" إلى أنه تمت إضافة DNase وإزالة تلوث الحمض النووي ، والنتيجة دقيقة)

تعني كل ترقية تقنية أن عملية التجربة تتطور في اتجاه أبسط وأكثر سهولة في الاستخدام.

تهدف Foregene إلى مساعدة المزيد من الباحثين العلميين على توفير الوقت والتكلفة التجريبية ، والحصول على نتائج تجريبية عالية الجودة ، وإنشاء إنجازات بحثية علمية أكثر قيمة بشكل مشترك.