تشبه طرق تفاعل البوليميراز المتسلسل وتلوث الهباء الجوي بالحمض النووي في مختبرات اختبار الحمض النووي وجهين لعملة واحدة.يمكننا فقط اختيار الحصول عليه أم لا ، لكن لا يمكننا اختيار ما إذا كنا نريده أو ننفقه.

1. فحص مزيل الحمض النووي

لتحقيق الإزالة المكانية لتلوث الهباء الجوي بالحمض النووي ، من الضروري أولاً فحص مزيلات الحمض النووي التي يمكنها إزالة الأحماض النووية في حالة سائلة.لأنه لا يوجد الكثير من مزيلات الحمض النووي التي تعمل حقًا.بالنسبة للطريقة التجريبية ، يرجى الرجوع إلى: لا يمكن أن يكون مزيل الحمض النووي "ركنًا سريًا" للمختبر!

في هذه التجربة ، تم خلط 100 نسخة / ميكرولتر (حوالي 31 دقيقة) من بلازميد ASFV ومزيل الحمض النووي بكميات متساوية ، ثم تفاعلوا في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق و 20 دقيقة و 30 دقيقة على التوالي.بعد استخراج الحمض النووي ، تم إجراء تضخيم qPCR.تمت مقارنة السيطرة الإيجابية الممزوجة بالبلازميد والماء.بما أن التجربة لم تكتمل في نفس الوقت ، فقد يكون هناك انحراف معين بين النتائج ، لكنه لا يؤثر على نتيجة التجربة.حتى الآن ، قمت بتقييم 10 منتجات تجارية لإزالة الحمض النووي.فقط المنتجات رقم 1 ورقم 6 ورقم 8 يمكنها أن تتحلل بشكل فعال من DNA البلازميد في الحالة السائلة.المنتجات الأخرى ليس لها أي تأثير تقريبًا.

الجدول 1 تأثير إزالة الحمض النووي لمزيل الحمض النووي المتاح تجاريًا

2. تجربة تأثير إزالة الحمض النووي للمطهرات شائعة الاستخدام

1. فحص المطهرات شائعة الاستخدام

هناك العديد من أنواع المطهرات التي يشيع استخدامها في المعامل: الألدهيدات والفينولات والكحول وأملاح الأمونيوم الرباعية والبيروكسيدات ومستحضرات الكلور والأحماض والقواعد.تم التحقق من تأثيرات التطهير لهذه المطهرات على الكائنات الحية الدقيقة بشكل كامل من خلال التجارب ، ولكن لا توجد بيانات تجريبية كافية حول تأثير تحلل الأحماض النووية.تحتاج مختبرات اختبار الحمض النووي إلى مطهر ليس له تأثير تطهير جيد على الكائنات الحية الدقيقة فحسب ، بل يمكنه أيضًا تدهور الحمض النووي.تظهر نتائج الاختبار أن محضرين فقط من الكلور يحتويان على 84 مطهرًا وحمض ثلاثي كلورو إيزوسيانوريك وحمض الهيدروكلوريك 1 مولار يفيان بالمتطلبات.نظرًا لأن حمض الهيدروكلوريك 1 M مادة شديدة التآكل ، يوصى باستخدام مستحضرات الكلور للتخلص من النفايات في مختبرات اختبار الحمض النووي.ومع ذلك ، فإن مستحضرات الكلور تآكل المعادن ولا يمكن استخدامها لتطهير الأدوات والمعدات.

الجدول 2 آثار إزالة الحمض النووي لأنواع مختلفة من المطهرات

2. الحد الأدنى من التركيز الفعال لمستحضرات الكلور

للمطهرات التي تحتوي على الكلور تأثير قوي على تدهور الحمض النووي ، ولكن نظرًا لتآكل المعادن وتهيجها ، يمكن استخدامها لتنظيف الأرضية ، وأسطح العمل غير المعدنية ، ونصائح النقع ، وأنابيب الطرد المركزي وعناصر الاختبار الأخرى.

وفقًا لـ "الإرشادات الفنية الجديدة للتطهير الوبائي للالتهاب الرئوي التاجي": الملوثات (دم المرضى وإفرازاتهم وقيئهم) مطهر يحتوي على الكلور 5 جم / لتر -10 جم / لتر ؛تستخدم الأرضيات والجدران وأسطح الأشياء المتاحة الكلور 1 جم / لتر مطهر الكلور: يتم نقع الملابس والمفروشات والمنسوجات الأخرى أولاً في مطهر الكلور مع 0.5 جم / لتر من الكلور المتاح لمدة 30 دقيقة ، ثم يتم تنظيفها كالمعتاد.

الجدول 3 تأثير إزالة الحمض النووي لتركيزات مختلفة من مطهر الكلور

تظهر نتائج الاختبار أنه: عندما يكون تركيز الكلور الفعال أكبر من أو يساوي 1.2 جم / لتر ، يمكن للمطهر المحتوي على الكلور أن يتحلل تمامًا من 100 نسخة / ميكرولتر من البلازميد عند استخدامه لمدة 5 دقائق.عند العمل لمدة 10 دقائق ، فإن 84 مطهرًا بتركيز كلور فعال أكبر من أو يساوي 0.6 جم / لتر يمكن أن يتحلل تمامًا من 100 نسخة / ميكرولتر من البلازميدات.

3. تجربة إزالة الهواء الملوث برذاذ الحمض النووي

كيف تنظف الهواء الملوث برذاذ الحمض النووي؟معظم الأفكار هي خلق بيئة ملوثة بالهباء الجوي ثم تنظيفها ، أو تنظيف الأحماض النووية بعد التلوث.بالنسبة لي ، فإن التجربة التي لا يمكن تكرارها ولا يمكن تحليل نتائجها كميًا لا معنى لها ، لذلك اقترضت بعض طرق تطهير الهواء.راجع "المتطلبات العامة GB27948-2020 لمطهرات الهواء" و "المواصفات الفنية للتطهير"

1. مواد الاختبار

1.1 مزيل الحمض النووي: في هذه التجربة ، تم اختيار اثنين من مزيلات الحمض النووي المتاحة تجاريًا 6 و 8 في الجدول 1.

1.2 اختبار البلازميد: بالنظر إلى أن قيمة التصوير المقطعي لمعظم تلوث المختبر ستكون أعلى من 30 ، فإن تركيز بلازميد الجين ASFV المستخدم هذه المرة هو حوالي 100 نسخة / ميكرولتر ، و PCR CT الكمي حوالي 31.07.أضف البلازميد إلى قطعة القطن المتدفقة وجففها بالهواء.

1.3 أداة الاختبار: أداة التطهير Bilingkehan KVBOX ، التي تدعمها شركة Shenzhen Runlian Environmental Technology Co.، Ltd. ، تتميز بأداء ممتاز في تطهير الهواء باستخدام مطهر بيروكسيد الهيدروجين ، ويمكنها أن تقتل بشكل فعال الجراثيم والكائنات الحية الدقيقة الأخرى.

1.4 مساحة الاختبار: نافذة تحويل مغلقة بحوالي 0.1 متر مكعب.

2. طريقة الاختبار

كمية المطهر الموضوعة على آلة التطهير هي 10 مل ، والتركيز 100 مل / م 3 ، وهو أعلى بكثير من "المتطلبات العامة لمطهرات الهواء GB27948-2020": عند استخدام مطهر رذاذ الهباء الجوي ، يجب أن تكون كمية المطهر 10 مل / م 3