بروتوكول PCR kit-UNG للأنسجة الحيوانية (بدون أدوات أخذ العينات)
الأوصاف
تستخدم هذه المجموعة نظامًا عازلًا فريدًا للتحلل لإطلاق الحمض النووي الجيني سريعًا من عينات الأنسجة الحيوانية لتفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل ، لذا فهي مناسبة بشكل خاص للاختبارات الجينية واسعة النطاق.
تكتمل عملية إطلاق الحمض النووي الجيني من المخزن المؤقت للتحلل في غضون 10-30 دقيقة عند 65 درجة مئوية.لا توجد عمليات أخرى مطلوبة مثل إزالة البروتين والحمض النووي الريبي ، ويمكن استخدام أثر الحمض النووي المنطلق كقالب لتفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل.
2 × PCR سهلTMيستخدم Mix (UNG) dUTP بدلاً من dTTP على أساس 2 × PCR EasyTMامزج ويضيف إنزيم UNG (Uracil-N-glycosylase) الذي يمكنه تحطيم القالب الذي يحتوي على dUTP في نفس الوقت.قبل تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل ، يُستخدم إنزيم UNG لتحطيم منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل الذي يحتوي على اليوراسيل.لن يكون لإنزيم UNG أي تأثير على القالب الذي لا يحتوي على اليوراسيل ، وبالتالي ضمان خصوصية ودقة التضخيم ومنع احتمال تلوث منتجات PCR أثناء الاختبارات الجينية واسعة النطاق.
D-Taq DNA polymerase هو بوليميريز DNA تم تطويره خصيصًا بواسطة Foregene لتفاعلات PCR المباشرة.يتمتع بوليميراز D-Taq DNA بقدرة تحمل قوية لمجموعة متنوعة من مثبطات تفاعل PCR ، ويمكنه تضخيم كميات ضئيلة من الحمض النووي بكفاءة في أنظمة التفاعل المعقدة المختلفة ، ويمكن أن تصل سرعة التضخيم إلى 2Kb / min ، وهو مناسب بشكل خاص لتفاعل تفاعل PCR المباشر.
مكونات الطقم
الجزء الأول | العازلة AL |
فورجين بروتياز | |
6 × تحميل العازلة DNA | |
الجزء الثاني | 2 × PCR سهلTMميكس (UNG) |
الميزات والمزايا
■لا تنقية الحمض النووي باهظة الثمن وتستغرق وقتًا طويلاً
■ الطلب على العينة صغير ، حيث يمكن اختبار 5 ملليجرام من الأنسجة الحيوانية.
■ ليست هناك حاجة إلى معالجة خاصة مثل الطحن والسحق ، والعملية بسيطة.
■ نظام تفاعل البوليميراز المتسلسل المحسن يجعل تفاعل البوليميراز المتسلسل يتمتع بخصوصية أعلى وتحمل أقوى لمثبطات تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل.
■ نظام مكافحة التلوث PCR 2×PCR سهلTMيزيل المزيج (UNG) بشكل فعال التلوث الناجم عن منتجات PCR ويضمن خصوصية ودقة التضخيم.
معلمات المجموعة
التطبيق: مجموعة متنوعة من الأنسجة الحيوانية.
تم إطلاق الحمض النووي من تحلل العينة: يستخدم فقط كقالب PCR.
يمكن استخدام العدة للأغراض التالية: تحديد الجينات ، التنميط الجيني الحيواني ، إلخ.
تدفق العمل
التخزين ومدة الصلاحية
يجب تخزين الجزء الأول من هذه المجموعة في 2-8℃.
يمكن تخزين كاشف Buffer AL لمدة 12 شهرًا في ظروف جافة ؛يمكن تخزينه في 2-8℃لتخزين أطول.
الكاشف Foregene Protease له صيغة فريدة.لضمان نشاطها واستقرارها ، يرجى تخزينها في 4℃لمدة 12 شهرًا.
الكاشف 6×يمكن تخزين المخزن المؤقت لتحميل الحمض النووي في 4℃أو -20℃لفترة طويلة.
يجب تخزين الجزء الثاني من هذه المجموعة في -20℃.
الكاشف 2×PCR سهلTMمزيج (UNG) ، إذا تم استخدامه بشكل متكرر ، فيمكن أيضًا تخزينه في 4℃للتخزين قصير المدى (يستخدم في غضون 10 أيام).