Lnc-RT Heroᵀᴹ I (مع gDNase) (Super Premix لتوليف cDNA الأول من lncRNA)
تحديد
25×20μل Rxns ، 50×20μل Rxns
Lnc-RT HeroTM I (مع gDNase) هو نظام نسخ عكسي تم تطويره خصيصًا لـ lncRNA لإزالة تلوث الحمض النووي الجيني بسرعة.يمكن لـ 5 × gDNase Mix إزالة الجينوم المتبقي في RNA بسرعة عند 42 درجة مئوية لمدة دقيقتين ، مما يؤدي بشكل فعال إلى تجنب تدخل الجينوم في نتائج qPCR.
يحتوي 5 × L-RT HeroTM Mix على Foregene LncRNA Reverse Transcriptase تم تطويره خصيصًا بواسطة Foregene ، وهو نوع جديد من النسخ العكسي خصيصًا لـ lncRNA وقوالب RNA المعقدة الأخرى ، مع تقارب RNA أقوى وكفاءة تسجيل عكسية أعلى.يجعل النظام الأمثل معدل النسخ العكسي أسرع ويمكنه بسهولة نسخ قوالب RNA بمحتوى GC عالي وبنية ثانوية معقدة.يمكن إكمال توليف حبلا (كدنا) الأول عند 42 درجة مئوية في 15 دقيقة.
مكونات الطقم
| 5× مزيج gDNase |
| 5× مزيج L-RT HeroTM |
| RNase خالية من ddH2O |
| تعليمات |
الميزات والمزايا
■القدرة الفعالة على إزالة جدنا ، والتي يمكن أن تزيل جدنا في القالب في غضون دقيقتين.
■ يمكنه عكس نسخ lncRNA بكفاءة.عندما يتعرض منتج النسخ العكسي لـ qPCR ، تكون قيمة Ct أقل من قيمة نظام النسخ العكسي التقليدي.
■ نظام النسخ العكسي الفعال ، يستغرق 15 دقيقة فقط لإكمال تركيب أول حبلا (كدنا).
■ القوالب المعقدة: يمكن أيضًا عكس القوالب ذات المحتوى العالي من GC والبنية الثانوية المعقدة بكفاءة عالية.
■ نظام النسخ العكسي عالي الحساسية ، يمكن أيضًا للقوالب على مستوى الصفحة الحصول على (كدنا) عالي الجودة.
■ يتمتع نظام النسخ العكسي باستقرار حراري مرتفع ، ودرجة حرارة التفاعل المثلى هي 42℃، ولا يزال يتمتع بأداء نسخ عكسي جيد عند 50℃.
تطبيق كيت
التحليل الكمي النسبي lncRNA.
التحليل الكمي المطلق lncRNA.
يمكنه تحليل تتبع الحمض النووي الريبي (RNA) بسرعة ودقة مثل فيروس RNA.
النسخ العكسي لقوالب الحمض النووي الريبي ذات المحتوى العالي من GC أو البنية الثانوية المعقدة.
تدفق العمل
التخزين ومدة الصلاحية
يجب تخزين الطقم عند -20°ج. قم بتخزين المنتج في ثلاجة بدرجة حرارة ثابتة عند -20°ج مباشرة بعد الاستلام.إذا كانت ظروف التخزين مناسبة ، فلن يؤدي المنتج إلى تدهور أي أداء خلال فترة الصلاحية التي تبلغ 1 عام.
دليل تحليل المشكلة
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-تضخيم محدد
1. تصميم التمهيدي غير معقول
التوصية: تصميم البادئات وفقًا لمبادئ التصميم التمهيدي.
2. بقايا الجينوم.
اقتراح: تأكد من أن الخطوة الأولى في درجة حرارة تفاعل إزالة gDNA هي 42 درجة مئوية ، ويمكن أيضًا تمديد وقت التفاعل إلى 5 دقائق.
لا توجد إشارة تضخيم بواسطة RT-qPCR
1. تدهورت الحمض النووي الريبي.
توصية: يجب أن تكون المواد المستخدمة في استخراج الحمض النووي الريبي جديدة قدر الإمكان ، ويجب استخدام الحمض النووي الريبي عالي الجودة وعالي النقاء.
2. يحتوي الحمض النووي الريبي على مثبطات.
توصية: تشتمل مثبطات النسخ العكسي بشكل عام على SDS ، وأملاح الجوانيدين ، و EDTA ، وما إلى ذلك. يوصى بغسل راسب الحمض النووي الريبي باستخدام 70٪ من الإيثانول لإزالة المثبطات.
3. قضايا التصميم التمهيدي.
توصية: وفقًا لمبدأ التصميم التمهيدي ، أعد تصميم الاشعال للفحص.
يظهر النطاق الهدف في عنصر التحكم الفارغ
1. تلوث أدوات التشغيل أو الكواشف.
توصية: يجب تعقيم جميع الكواشف أو المعدات اللازمة للتجربة.كن حذرًا ولطيفًا عند المناولة لمنع امتصاص عينات الحمض النووي في الماصة أو انسكابها من أنبوب الطرد المركزي.
2. حدث تلوث أثناء تحضير نظام تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل.
توصية: اتخذ الاحتياطات اللازمة عند المناولة ، مثل: ارتداء قفازات من اللاتكس ، واستخدام رؤوس المرشح.استخدم Real Time PCR Mix في نظام مقاوم للتلوث.
3. تدهورت الاشعال.
اقتراح: استخدام الرحلان الكهربائي SDS-PAGE لاكتشاف ما إذا كانت البادئات متدهورة ، واستبدالها بأجهزة أولية جديدة لتجارب الكشف عن التألق.
كتيب التعليمات:
Lnc-RT HeroTM I (مع gDNase) (Super Premix لتوليف cDNA من أول حبلا من lncRNA) دليل التعليمات
