مسحة الشدق / طقم عزل الحمض النووي لبطاقة FTA / طقم استخراج الحمض النووي الجيني أو طقم Purifiaction من مسحات الخد
وصف المجموعة:
تنقية الحمض النووي الجيني عالي الجودة بسرعة من عينات مسحة الشدق / بطاقة FTA.
◮لا تلوث RNase:يتيح عمود الحمض النووي فقط الذي توفره المجموعة إمكانية إزالة الحمض النووي الريبي من الحمض النووي الجيني دون إضافة RNase أثناء التجربة ، مما يمنع المختبر من التلوث بواسطة RNase الخارجي.
◮السرعة:بروتياز Foregene له نشاط أعلى من البروتياز المماثلة ، ويهضم عينات الأنسجة بسرعة ؛العملية بسيطة ، ويمكن إتمام عملية استخراج الحمض النووي الجيني في غضون 20-80 دقيقة.
◮مريح:يتم إجراء الطرد المركزي في درجة حرارة الغرفة ، وليس هناك حاجة لطرد مركزي بدرجة حرارة منخفضة 4 درجات مئوية أو ترسيب الإيثانول للحمض النووي.
◮أمان:لا يلزم استخراج الكاشف العضوي.
◮جودة عالية:يحتوي الحمض النووي الجيني المستخرج على أجزاء كبيرة ، لا يحتوي على RNA ، ولا يحتوي على RNase ، ومحتوى أيوني منخفض للغاية ، والذي يمكن أن يلبي متطلبات التجارب المختلفة.
◮نظام مايكرو شطف:يمكن أن يزيد من تركيز الحمض النووي الجيني ، وهو مناسب لاكتشاف أو تجربة المصب.
وصف
توفر هذه المجموعة طريقة فعالة وسريعة للحصول على الحمض النووي الجيني عالي التركيز من مسحات الشدق وبطاقة FTA (بقع الدم).باستخدام شركتنا"يمكن استخراج عمود وصيغة غشاء السيليكا الفريد من نوعه الخاص بالحمض النووي فقط ، جنبًا إلى جنب مع Foregene Protease ، يمكن استخراج الحمض النووي الجيني عالي الجودة والتركيز في 80 دقيقة.يربط عمود التنقية الصغير المصمم خصيصًا الحمض النووي الجيني ، ويمكن التخلص من الحمض النووي بكمية صغيرة (15 ميكرولتر) نظام شطف لزيادة تركيز الحمض النووي الجيني الذي تم الحصول عليه ، وهو مناسب لاكتشاف أو تجربة المصب.يمكن للمجموعة معالجة عينة واحدة أو أكثر في وقت واحد ، ولا تتطلب عملية التنقية استخراج المواد العضوية مثل الفينول والكلوروفورم والأيزوبروبانول أو ترسيب الإيثانول الذي يستغرق وقتًا طويلاً ، والعملية بسيطة وموفرة للوقت.
تحديد
50 الإعدادية
مكونات الطقم
| العازلة ST1 |
| العازلة ST2 |
| مادة الأكريلاميد الخطية |
| العازلة PW |
| العازلة WB |
| العازلة EB |
| فورجين بروتياز |
| عمود الحمض النووي فقط |
| تعليمات |
الميزات والمزايا
- عدم تلوث RNase: يتيح عمود الحمض النووي فقط الذي توفره المجموعة إمكانية إزالة الحمض النووي الريبي من الحمض النووي الجيني دون إضافة RNase أثناء التجربة ، وتجنب تلوث المختبر بواسطة RNase الخارجي.
-سرعة عالية: بروتياز Foregene له نشاط أعلى من البروتياز المماثل ، ويهضم العينات بسرعة ؛عملية بسيطة.
-مريح: يتم إجراء الطرد المركزي في درجة حرارة الغرفة ، ولا توجد حاجة للطرد المركزي بدرجة حرارة منخفضة 4 درجات مئوية أو ترسيب الإيثانول للحمض النووي.
- السلامة: لا يلزم استخراج الكاشف العضوي.
جودة عالية: يحتوي الحمض النووي الجيني المستخرج على أجزاء كبيرة ، لا يحتوي على RNA ، ولا يحتوي على RNase ، ومحتوى أيوني منخفض للغاية ، والذي يمكن أن يلبي متطلبات التجارب المختلفة.
-نظام الشطف الجزئي: يمكن أن يزيد من تركيز الحمض النووي الجيني ، وهو مناسب لاكتشاف أو تجربة المصب.
تطبيق كيت
وهي مناسبة لتنقية الحمض النووي من العينات التالية: مسحات الشدق ، بطاقة FTA (بقع الدم).
التخزين ومدة الصلاحية
- يمكن تخزين هذه المجموعة لمدة 12 شهرًا في ظروف جافة في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) ؛إذا احتاجت إلى التخزين لفترة أطول ، فيمكن تخزينها في 2-8 درجة مئوية.
ملاحظة: إذا تم تخزينه في درجة حرارة منخفضة ، يكون المحلول عرضة لهطول الأمطار.قبل الاستخدام ، تأكد من وضع المحلول في المجموعة في درجة حرارة الغرفة لفترة من الوقت.إذا لزم الأمر ، قم بتسخينه مسبقًا في حمام مائي 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق لإذابة الراسب ، واخلطه قبل الاستخدام.
- يحتوي محلول Foregene Protease على تركيبة فريدة تنشط عند تخزينها في درجة حرارة الغرفة لفترة طويلة (3 أشهر) ؛سيكون نشاطها واستقرارها أفضل عند تخزينها في 4 درجات مئوية ، لذلك يوصى بتخزينها عند 4 درجات مئوية ، تذكر عدم الاحتفاظ بها عند -20 درجة مئوية.
عمود التنقية مسدود
في هذه المجموعة ، في عملية استخراج الحمض النووي الجيني ، يتم امتصاص عمود التنقية مباشرة على عينة خليط التحلل الأنزيمي بدون خطوة الطرد المركزي ، وقد يتم حظر عمود التنقية بسبب الإنزيم غير الكامل واللزوجة العالية للعينة.
الأسباب المحتملة التالية هي كما يلي:
1. عدم اكتمال الهضم الأنزيمي لعينات الأنسجة.
توصية: يمكن تمديد وقت معالجة عينة Foregene Protease بشكل مناسب أو يمكن أخذ المادة الطافية بعد الطرد المركزي عند 12000 دورة في الدقيقة (~ 13400 × جم) لمدة 5 دقائق.
2. الإفراط في استخدام عينات الأنسجة أو الأنسجة الكبيرة.
توصية: من الأفضل عدم تجاوز مسحة شدق واحدة في العينة ؛إذا كانت العينة كبيرة جدًا ، فقم بزيادة جرعة Buffer ST1 ، Foregene Protease ، المخزن المؤقت ST2 وفقًا لذلك.
3. لزوجة العينة عالية جدا.
توصية: يمكن تخفيف العينات بشكل مناسب باستخدام 10 ملي مولار من Tris-HCl قبل استخراج الحمض النووي الجيني.
4. تم امتصاص أجزاء من بطاقة الدم.
توصية: يمكن تمديد وقت الطرد المركزي العابر للخطوة 6 من الاستخراج الجيني لبقعة الدم (بطاقة FTA) بشكل مناسب.
غلة منخفضة أو عدم وجود حمض نووي
غالبًا ما توجد مجموعة متنوعة من العوامل التي تؤثر على إنتاجية الحمض النووي الجيني ، بما في ذلك أصل العينة ، وظروف تخزين العينة ، وإعداد العينة ، والتلاعب ، وما إلى ذلك.
لا يمكن الحصول على الحمض النووي الجيني أثناء الاستخراج
الأسباب المحتملة هي كما يلي:
1. يؤدي الحفظ غير السليم للعينات أو التخزين لفترة طويلة إلى تدهور الحمض النووي الجيني.
توصية: يفضل أخذ عينات جديدة من المسحات الفموية ، ولا ينصح باستخدام المسحات المحفوظة في عمليات استخراج الحمض النووي الجيني ؛يجب أن تضمن عينات بقعة الدم أن الجودة مؤهلة ويجب ألا يكون وقت التخزين طويلاً جدًا.
2. قد يؤدي استخدام الأنسجة القليل جدًا إلى عدم استخراج الحمض النووي الجيني المقابل.
توصية: اتبع تعليمات أخذ عينات مسحة من الشدق في دليل العملية ، وامسح أكبر عدد ممكن من المرات بحيث يمكن ربط خلايا كافية بمسحة الفم لاستخراج الحمض النووي الجيني ؛لسحب عينة بقعة الدم ، يمكن زيادة منطقة قطع بقعة الدم بشكل مناسب.
3. يتم حفظ Foregene Protease بشكل غير صحيح ، مما يؤدي إلى انخفاض نشاطه أو تعطيله.
توصية: تأكيد شروط تخزين Foregene Protease أو استبداله ببروتياز Foregene جديد للتفاعل الأنزيمي.
4. الحفظ غير السليم للمجموعة أو وقت التخزين طويل جدًا ، مما يؤدي إلى تعطل بعض المكونات في المجموعة.
توصية: شراء مجموعة جديدة لعزل الحمض النووي لمسحة الخد للإجراءات ذات الصلة.
5. لا يضيف العازلة WB الإيثانول المطلق.
توصية: تأكد من أن المخزن المؤقت WB يضيف الحجم الصحيح من الإيثانول المطلق.
6. لم يتم إضافة eluent بشكل صحيح إلى فيلم السيليكون.
التوصية: أضف قطرات شطف مُسبقة التسخين 65 درجة مئوية إلى منتصف غشاء السيليكون واتركها في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق لزيادة كفاءة الشطف.
عزل الحمض النووي الجيني منخفض الغلة
الأسباب المحتملة التالية هي كما يلي:
1. يؤدي الحفظ غير السليم للعينات أو التخزين لفترة طويلة إلى تدهور الحمض النووي الجيني.
توصية: يفضل أخذ عينات من المسحات الفموية حديثًا ، ويجب عدم استخدام المسحات المحفوظة لاستخراج الحمض النووي الجيني.
2. إذا كانت كمية عينة الأنسجة صغيرة جدًا ، فسيكون محتوى الحمض النووي الجيني المستخرج أقل.
توصية: اتبع تعليمات أخذ عينات المسحة الفموية في دليل التشغيل ، وامسح أكبر عدد ممكن من المرات بحيث يمكن ربط خلايا كافية بالمسحة الفموية لاستخراج الحمض النووي الجيني.
3. يتم حفظ Foregene Protease بشكل غير صحيح ، مما يؤدي إلى انخفاض نشاطه أو تعطيله.
توصية: تأكيد شروط تخزين Foregene Protease أو استبداله ببروتياز Foregene جديد للتفاعل الأنزيمي.
4. مشاكل Eluent.
توصية: استخدم Buffer EB للشطف ؛في حالة استخدام ddH2O أو شطفات أخرى ، تأكد من أن الرقم الهيدروجيني للشطف بين 7.0-8.5.
5. لم يتم إضافة الشذبة بشكل صحيح بالتنقيط.
التوصية: أضف قطرات eluent إلى منتصف غشاء السيليكون واتركها في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق لزيادة كفاءة الشطف.
6. سائل الشطف يتراكم القليل جدًا.
توصية: استخدم eluent لشطف الحمض النووي الجيني كما هو مطلوب في التعليمات ، على الأقل 15 ميكرولتر.
نقاوة منخفضة من الحمض النووي المعزول
يمكن أن يؤدي انخفاض نقاء الحمض النووي الجيني إلى فشل أو نتائج غير مرضية للتجارب اللاحقة ، مثل: لا يمكن قطع الإنزيمات ، ولا يمكن لـ PCR الحصول على جزء الجين المطلوب ، إلخ.
الأسباب المحتملة هي كما يلي:
1. تلوث البروتينات المغايرة ، تلوث الحمض النووي الريبي.
التحليل: لم يتم غسل عمود التنقية باستخدام Buffer PW ؛لم يتم غسل عمود تنقية الغسيل Buffer PW باستخدام سرعة الطرد المركزي الصحيحة.
توصية: تأكد من عدم وجود ترسيب في المادة الطافية قبل إضافة الإيثانول ؛تأكد من غسل عمود التنقية حسب التعليمات ، ولا يمكن حذف هذه الخطوة.
2. التلوث الأيوني الشوائب.
التحليل: تم حذف عمود تنقية الغسيل المؤقت WB أو غسله مرة واحدة فقط ، مما أدى إلى تلوث أيوني متبقي.
توصية: تأكد من غسل Buffer WB مرتين حسب التوجيهات لإزالة الأيونات المتبقية قدر الإمكان.
3. التلوث بإنزيم الحمض النووي الريبي.
التحليل: تمت إضافة RNases الأجنبية إلى المخزن المؤقت ؛كانت عملية غسل Buffer PW غير صحيحة ، مما أدى إلى وجود بقايا RNase ، مما أثر على العمليات التجريبية لـ RNA المصب ، مثل النسخ في المختبر.
توصية: يمكن لمجموعات عزل الحمض النووي من سلسلة Foregene إزالة الحمض النووي الريبي دون إضافة إضافية لـ RNase ، وبالتالي لا تحتاج مجموعة عزل DNA لبطاقة المسحة الشدقية / FTA Card إلى إضافة RNase ؛تأكد من اتباع التعليمات الخاصة بعمود تنقية الغسيل Buffer PW ، ولا يمكن حذف هذه الخطوة.
4. بقايا الايثانول.
التحليل: لم يقم Buffer WB بإجراء الطرد المركزي للأنبوب الفارغ بعد غسل عمود التنقية.
توصية: قم بإجراء عملية الطرد المركزي للأنبوب الفارغ الصحيح وفقًا للتعليمات.
5. تلوث النجاسة الأخرى.
التحليل: العينات المحفوظة أو العينات الخاصة لا تتم معالجتها مسبقًا.
توصية: معالجة العينة تمامًا وفقًا للتعليمات.
