طقم RT-qPCR المباشر
وصف
توفر Direct RT-qPCR Kit مخزنًا مؤقتًا RT-qPCR معبأ بشكل منفصل وإنزيم عالي الكفاءةالخليط (Taq 、 M-MLV 、 RI) مما يجعله مناسبًا لإنشاء مجموعات الخلفية والنظامتعديل , ضمن عملية تحقق بسيطة.
تحديد
500 طن ، 50000 طن
مكونات الطقم
محتويات المجموعة (نظام رد فعل 20 ميكرولتر) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 ت | 50000 ت | |
خليط الانزيم المباشر | 500 ميكرولتر× 1 | 50 مل× 1 |
2 × Direct RT-qPCR العازلة | 1 مل× 5 | 500 مل× 1 |
تعليمات | 1 | 1 |
خطوات التشغيل
قبل تحضير الكاشف ، يجب إذابة جميع الكواشف الموجودة في المجموعة في درجة حرارة الغرفة وخلطها برفق.
A: يحضر of نموذج و كاشف
1. إعداد قالب الحمض النووي الريبي المحضر (يوصى باستخدام مجموعة أدوات سلسلة Foregene Total RNA Isolation Kit لاستخراج وتنقية قالب الحمض النووي الريبي) أو نموذج تكسير المنتج (يوصى باستخدام نظام تحلل Foregene) ، وأشعال محددة (10 ميكرومتر) وغيرها من المواد الاستهلاكية ذات الصلة ، والأداة.
2. ضع المخزن المؤقت 2 × Direct RT-qPCR ، و ddH2O الخالي من RNase و 20 × صبغة مرجعية ROX (إذا كان"يلزم) في العلبة مع الثلج ، مما يجعلها تذوب بشكل طبيعي ، وتخلط بلطف.
B: يحضر of RT-QPCR نظام
طاولة 1 : يحضر of RT-QPCR system
عنصر | مقدار | التركيز النهائي |
2 × Direct RT-qPCR العازلة | 10 ميكرولتر | 1 × |
خليط الانزيم المباشر | 1ميكرولتر | |
التمهيدي الأمامي (10 ميكرومتر) | 0.8 ميكرولتر | 50-900 نانومتر |
عكس التمهيدي (10 ميكرومتر) | 0.8 ميكرولتر | 50-900 نانومتر |
دقق (4 ميكرومتر) | 1ميكرولتر | 200 نانومتر |
قالب (RNA أو Lysate) | X ميكرولتر | |
20 × صبغة مرجعية ROX | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6.4-X) ميكرولتر | |
الحجم الكلي | 20ميكرولتر |
C: تعيين ال RT-QPCR رد فعل برنامج
طاولة 2 : RT-QPCR رد فعلon برنامج جلسة (ل مثال: اثنين-خطوة طريقة)
خطوة | درجة حرارة | وقت | دورات | محتوى | |
1 | 50 | 15 دقيقة | 1* | 1 | النسخ العكسي |
2 | 95 ℃ | 1 دقيقة | 1 | قبل التمسخ | |
3 | 95 ℃ | 10 ثوانى | 40-45 | تمسخ | |
60 | 30 ثانية 2 * | يصلب / تمديد |
التخزين ومدة الصلاحية
- يجب تخزين الطقم عند -20± 5℃.فترة الصلاحية 12 شهرًا.
- تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة (أقل من 5 دورات).