مجموعة RT-qPCR المباشرة
وصف المجموعة:
◮لتضخيم RNA المباشر في الوقت الحقيقي من مجموعات المسحة بدون عمليات تنقية RNA.تكمل هذه المجموعة دورات qRT-PCR في غضون ساعة واحدة.مزيج الإنزيم هو مزيج محسن من النسخ العكسي ، وبوليميراز DNA Taq الساخن ، ومثبط RNase.يحتوي مخزن التفاعل على جميع المكونات المطلوبة ، بما في ذلك مكونات المخزن المؤقت المُحسَّنة ، Mg2+و dUTP و dNTPs.
وصف
تم تصميم مجموعة FORDirect RT-qPCR لتضخيم RNA المباشر في الوقت الحقيقي من مجموعات المسحة بدون عمليات تنقية RNA.تكمل هذه المجموعة دورات qRT-PCR في غضون ساعة واحدة.مزيج الإنزيم هو مزيج محسن من النسخ العكسي ، وبوليميراز DNA Taq الساخن ، ومثبط RNase.يحتوي مخزن التفاعل على جميع المكونات المطلوبة ، بما في ذلك مكونات المخزن المؤقت المُحسَّنة ، Mg2+و dUTP و dNTPs.
تحديد
100 ت
مكونات الطقم
| عامل إطلاق الحمض النووي |
| حامية RNA |
| 2 × RT-qPCR العازلة |
| خليط الإنزيم (Taq & M-MLV) |
| تعليمات |
تطبيق PCR
1. بمجرد أن يتم طرد أنابيب تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل لفترة وجيزة ، ضعها في خزان العينة لجهاز التضخيم.
2. البروتوكول الحراري
| خطوة | درجة حرارة | وقت | دورات | |
| 1 | النسخ العكسي | 50 | 15 دقيقة | 1 |
| 2 | قبل التمسخ | 95 ℃ | 1 دقيقة | 1 |
| 3 | تمسخ | 95 ℃ | 10 ثواني | 42 |
| 4 | يصلب / تمديد | 60 | 30 ثانية | |
ملحوظة:تم الكشف عن إشارة الفلورسنت مباشرة بعد خطوة التمديد لكل دورة.
3. بعد الإعداد ، احفظ الملف وقم بتشغيل برنامج التفاعل.
خطوات التشغيل
قبل تحضير الكاشف ، يجب إذابة جميع الكواشف الموجودة في المجموعة في درجة حرارة الغرفة وخلطها برفق.
تحضير الكاشف
1. تحضير مزيج إطلاق الحمض النووي
| عنصر | الحجم لكل عينة أو عنصر تحكم |
| عامل إطلاق الحمض النووي | 5 ميكرولتر |
| حامية RNA | 0.5 ميكرولتر |
2. تحضير خليط التفاعل
| عنصر | الحجم لكل عينة أو عنصر تحكم |
| 2 × RT-qPCR العازلة | 15 ميكرولتر |
| خليط الإنزيم (Taq & M-MLV) | 1.5 ميكرولتر |
| الاشعال والمسابر | 1 ميكرولتر |
التخزين ومدة الصلاحية
- يجب تخزين الطقم عند -20± 5℃.فترة الصلاحية 12 شهرًا.
- تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة (أقل من 5 دورات).
