طقم عزل DNA و RNA الفيروسي أطقم إعداد تنقية استخراج DNA و RNA
تحديد
50 الإعدادية ، 200 الإعدادية
تستخدم مجموعة استخراج عزل الحمض النووي RNA الفيروسي عمود الدوران والصيغة التي طورتها Foregene ، والتي يمكنها استخراج الحمض النووي الريبي الفيروسي عالي النقاء وعالي الجودة من عينات مثل البلازما والمصل وسوائل الجسم الخالية من الخلايا وطاف ثقافة الخلية.تضيف المجموعة على وجه التحديد مادة الأكريلاميد الخطية ، والتي يمكنها بسهولة التقاط كميات صغيرة من الحمض النووي الريبي من العينات.يمكن لعمود RNA-Only ربط RNA بكفاءة.يمكن للمجموعة معالجة عدد كبير من العينات في نفس الوقت.
لا تحتوي المجموعة بأكملها على RNase ، لذلك لن يتحلل الحمض النووي الريبي المنقى.يمكن أن يضمن Buffer viRW1 و Buffer viRW2 أن الحمض النووي الفيروسي الذي تم الحصول عليه خالي من البروتين أو النيوكلياز أو الشوائب الأخرى ، والتي يمكن استخدامها مباشرة في تجارب البيولوجيا الجزيئية النهائية.
مكونات الطقم
| مادة الأكريلاميد الخطية |
| العازلة DRL |
| العازلة RW1 ، العازلة RW2 |
| RNase خالية ddH2O |
| عمود الحمض النووي / الحمض النووي الريبي |
| تعليمات |
الميزات والمزايا
■ التشغيل في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) طوال العملية برمتها ، بدون حمام ثلجي وطرد مركزي بدرجة حرارة منخفضة.
■ مجموعة كاملة خالية من RNase ، لا داعي للقلق بشأن تدهور الحمض النووي الريبي.
■ إنتاجية عالية من الحمض النووي: يمكن لعمود الحمض النووي / الحمض النووي الريبي فقط والصيغة الفريدة تنقية الحمض النووي والحمض النووي الريبي بكفاءة.
■ سعة كبيرة لمعالجة العينات: يمكن معالجة ما يصل إلى 200 ميكرولتر من العينات في كل مرة.
■ السرعة: سهل التشغيل ويمكن إتمامه في غضون 20 دقيقة.
■ السلامة: لا يلزم وجود كاشف عضوي.
■ جودة عالية: تتميز شظايا الحمض النووي الريبي المنقى بدرجة نقاء عالية وخالية من البروتين والشوائب الأخرى ، ويمكن أن تلبي العديد من التطبيقات التجريبية النهائية.
تطبيق كيت
إنها مناسبة لاستخراج وتنقية الحمض النووي الفيروسي في عينات مثل البلازما والمصل وسوائل الجسم الخالية من الخلايا وطاف ثقافة الخلية.
تدفق العمل
رسم بياني
التخزين ومدة الصلاحية
■ يمكن تخزين هذه المجموعة لمدة 24 شهرًا في ظروف جافة في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) ؛إذا كانت بحاجة إلى التخزين لفترة أطول ، فيمكن تخزينها في 2-8 ℃.
يمكن تخزين محلول الأكريلاميد الخطي في درجة حرارة الغرفة لمدة 7 أيام.بعد استلام المجموعة ، يرجى إخراجها وتخزينها في درجة حرارة -20 درجة مئوية.
■ بعد إضافة مادة الأكريلاميد الخطية إلى Buffer DRL ، يمكن تخزينها في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية لمدة تصل إلى 48 ساعة.الرجاء استخدام الحل الجاهز.
دليل تحليل المشكلة
فيما يلي تحليل للمشكلات التي قد تواجه في استخراج الحمض النووي الريبي / الحمض النووي الريبي الفيروسي ، على أمل أن تكون مفيدة في تجاربك.بالإضافة إلى ذلك ، بالنسبة للمشكلات التجريبية أو الفنية الأخرى بخلاف تعليمات التشغيل وتحليل المشكلات ، فقد خصصنا الدعم الفني لمساعدتك.إذا كان لديك أي احتياجات ، يرجى الاتصال بنا: 028-83360257 أو البريد الإلكتروني:
Tech@foregene.com.
لا يوجد استخراج حمض نووي أو عائد حمض نووي منخفض
عادة ما يكون هناك العديد من العوامل التي تؤثر على كفاءة الاسترداد ، مثل: عينة محتوى الحمض النووي ، طريقة التشغيل ، حجم الشطف ، إلخ.
تحليل الأسباب الشائعة:
1. تم إجراء حمام جليدي أو طرد مركزي بدرجة حرارة منخفضة (4 درجات مئوية) أثناء الإجراء.
اقتراح: تعمل في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) طوال العملية برمتها ، لا تستخدم حمام ثلجي وطرد مركزي بدرجة حرارة منخفضة.
2. تم تخزين العينة بشكل غير صحيح أو تم تخزين العينة لفترة طويلة جدًا.
توصية: تخزين العينات في درجة حرارة -80 درجة مئوية وتجنب التجميد والذوبان المتكرر ؛حاول استخدام العينات التي تم جمعها حديثًا لاستخراج الحمض النووي.
3. تحلل العينة غير الكافي.
توصية: يرجى التأكد من خلط العينة ومحلول التحلل جيدًا واحتضانها في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق.
4. إضافة غير صحيحة من eluent.
اقتراح: تأكد من إضافة ddH2O الخالي من RNase إلى منتصف غشاء عمود التنقية ، ولا تسقطه على حلقة عمود التنقية.
5. لم يتم إضافة الحجم الصحيح من الإيثانول المطلق إلى Buffer RW2.
اقتراح: يرجى اتباع التعليمات وإضافة الحجم الصحيح من الإيثانول المطلق إلى Buffer RW2 وتخلط جيدًا قبل استخدام المجموعة.
6. حجم العينة غير مناسب.
الاقتراح: تتم معالجة 200 ميكرولتر من العينة لكل 500 ميكرولتر من Buffer DRL.ستؤدي معالجة العينات المفرطة إلى انخفاض إنتاجية استخراج الحمض النووي.
7. حجم شطف غير مناسب أو شطف غير كامل.
التوصية: الحجم الخفيف لعمود التنقية هو 30-50 مايكرولتر ؛إذا كان تأثير الشطف غير مُرضٍ ، فمن المستحسن تمديد الوقت في درجة حرارة الغرفة بعد إضافة RNase-Free ddH2O المسخن ، مثل 5-10min.
8. يبقى الإيثانول على العمود بعد غسله بالمخزن المؤقت RW2.
اقتراح: إذا بقي الإيثانول بعد الطرد المركزي باستخدام Buffer RW2 لمدة دقيقتين ، فيمكن وضع العمود في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق بعد الطرد المركزي لإزالة الإيثانول المتبقي تمامًا.
يتحلل الحمض النووي المنقى
ترتبط جودة الحمض النووي المنقى بالحفاظ على العينة وتلوث RNase والتشغيل وعوامل أخرى.تحليل الأسباب الشائعة:
1. لم يتم تخزين العينات التي تم جمعها في الوقت المناسب.
اقتراح: إذا لم يتم استخدام العينة في الوقت المناسب بعد جمعها ، يرجى تخزينها في درجة حرارة -80 درجة مئوية عند درجة حرارة منخفضة على الفور.لاستخراج الحمض النووي الريبي ، حاول استخدام العينات التي تم جمعها حديثًا.
2. جمع العينات وتجميدها وذوبان الجليد بشكل متكرر.
اقتراح: تجنب التجميد والذوبان (ليس أكثر من مرة) أثناء جمع العينات وتخزينها ، وإلا سينخفض إنتاج الحمض النووي.
3. يتم إدخال RNase في غرفة العمليات أو عدم ارتداء القفازات والأقنعة التي تستخدم لمرة واحدة وما إلى ذلك.
توصية: من الأفضل إجراء تجارب استخراج الحمض النووي الريبي في غرفة عمليات منفصلة للحمض النووي الريبي ، ويجب تنظيف طاولة المختبر قبل التجربة.
قم بارتداء القفازات والأقنعة التي تستخدم لمرة واحدة أثناء التجربة لتجنب تدهور الحمض النووي الريبي الناجم عن إدخال RNase إلى أقصى حد.
4. تلوث الكاشف بـ RNase أثناء الاستخدام.
توصية: استبدل بمجموعة جديدة لعزل الحمض النووي الريبي / الحمض النووي الريبي للتجارب ذات الصلة.
5. أنابيب الطرد المركزي وأطراف الماصة المستخدمة في معالجة RNA ملوثة بـ RNase.
اقتراح: تأكد من أن أنابيب أجهزة الطرد المركزي ، وأطراف الماصة ، والماصات ، وما إلى ذلك المستخدمة لاستخراج الحمض النووي الريبي ، كلها خالية من RNase.
يؤثر الحمض النووي المنقى على تجارب المصب
يتم تنقية الحمض النووي والحمض النووي الريبي بواسطة عمود التنقية ، إذا كان محتوى أيون الملح والبروتين مرتفعًا جدًا ، فسيؤثر ذلك على التجارب النهائية ، مثل: تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل ، النسخ العكسي ، إلخ.
1. الحمض النووي والحمض النووي الريبي المزال لهما أيونات ملح متبقية.
اقتراح: تأكد من إضافة الحجم الصحيح من الإيثانول المطلق إلى Buffer RW2 ، واغسل عمود التنقية مرتين بسرعة الطرد المركزي المحددة في تعليمات التشغيل ؛قم بإجراء الطرد المركزي لتقليل تلوث أيون الملح.
2. الحمض النووي المزال والحمض النووي الريبي لهما بقايا إيثانول.
اقتراح: بعد تأكيد الغسيل باستخدام Buffer RW2 ، قم بإجراء الطرد المركزي للأنبوب الفارغ بسرعة الطرد المركزي في تعليمات التشغيل ؛إذا كان لا يزال هناك بقايا من الإيثانول ، فيمكنك الطرد المركزي للأنبوب الفارغ ثم وضعه في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق لإزالة بقايا الإيثانول إلى أقصى حد.
كتيبات التعليمات:
دليل تعليمات طقم عزل الحمض النووي الريبي الفيروسي والحمض النووي الريبي
